Апоптоз и уровень семейства белков Bcl- и трансформирующего фактора роста β1 сигнальных протеинов у собак с миксоматозной болезнью митрального и трикуспидального клапанов
Авторы - Сурачетпонг С, Йиранантасак Т, Рунгсипипат А, Ортон EC.
Реферат статьи
Цели исследования: Для того, чтобы определить процент клеток, подвергающихся апоптозу в собачьих клапанов с миксоматозными поражениями и оценить, может ли быть замешан трансформирующий фактор роста β1 в качестве антиапоптозного сигнала через семейство сигнальных белков Bcl-2.
ЖИВОТНЫЕ: Посмертно полученные створки митрального клапана от 5 клинически здоровых собак, 5 собак на ранней стадии заболевания миксоматозной патологии митрального клапана (эндокардиоз) и 5 собак с поздней стадией миксоматозной дегенеративной болезни левого атривентрикулярного клапана.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: Число клеток, экспрессирующих расщеплением каспазой-3, фрагментация ДНК (TUNEL-маркер) и апоптотических тел были оценены в качестве степени апоптоза. Для того, чтобы оценить связь между сигнализацией трансформирующего фактора роста β1 и апоптозом, обилие активированного трансформирующим фактором роста β1 сигнального белка, фосфорилированного Smad 2/3 (р-Smad 2/3), и семейства белков Bcl-2 (проапоптотического Bax и Антиапоптозный BCL-2 ) определялась с помощью иммуногистохимии.
РЕЗУЛЬТАТЫ: Клетки створок митрального клапана у клинически здоровых собак и на обеих стадиях миксоматозной болезнью митрального клапанов выразили маркер TUNEL и расщепление каспазой-3, но не наличие апоптотических тел. Процент TUNEL маркера и скола каспазы-3 положительных ядер существенно не отличалась между группами собак (р>0,05). P-Smad 2/3 и Вах были более распространены у собак с миксоматозной болезнью митрального клапанов в то время как Bcl-2 был менее обильными. P-Smad 2/3 увеличились в основном в предсердном слое и обильно увеличился лишь на поздней стадии миксоматозной болезни митрального клапанов у собак.
ВЫВОДЫ: Эти данные свидетельствуют о том, что интерстициальные клетки у собак, больных миксоматозной болезнью митрального клапана находятся в проапоптотическом состоянии. Тем не менее, они не выполняют апоптоз. Таким образом, апоптоз не объясняет различия в клеточной плотности в атриовентрикулярном клапане собак с миксоматозной болезнью митрального клапанов. Сигнализации трансформирующим фактором роста β1 через канонический SMAD путь увеличивается при миксоматозной болезни митральных клапанов собак, но по-видимому, не опосредует междоузелковый апоптоз у собак при эндокардиозе АВ-клапанов.
Литература
Apoptosis and abundance of Bcl-2 family and transforming growth factor β1 signaling proteins in canine myxomatous mitral valves / Surachetpong S., Jiranantasak T., Rungsipipat A., Orton E.C. // J. Vet. Cardiol. – 2013. - Vol. 15(3). – P. 171-180.
Оригинальный текст
J Vet Cardiol. 2013 Sep;15(3):171-80. doi: 10.1016/j.jvc.2013.02.005. Epub 2013 Jun 29.
Apoptosis and abundance of Bcl-2 family and transforming growth factor β1 signaling proteins in canine myxomatous mitral valves.
Surachetpong S, Jiranantasak T, Rungsipipat A, Orton EC.
Abstract
OBJECTIVES: To determine the percentage of cells undergoing apoptosis within canine myxomatous valves and to evaluate whether TGFβ1 can be implicated as an anti-apoptosic signal through the Bcl-2 family of signaling proteins.
ANIMALS: Post-mortem mitral valve leaflets harvested from 5 normal dogs, 5 dogs with early-stage myxomatous mitral valve disease (MMVD), and 5 dogs with late-stage MMVD.
MATERIALS AND METHODS: The number of cells expressing cleaved caspase-3, DNA fragmentation (TUNEL marker) and apoptotic bodies were evaluated as a measure of apoptosis. To evaluate the relationship between TGFβ1 signaling and apoptosis, the abundance of activated TGFβ1 signaling protein, phosphorylated Smad 2/3 (p-Smad 2/3), and Bcl-2 family proteins (pro-apoptotic Bax and anti-apoptotic Bcl-2) was determined by immunohistochemistry.
RESULTS: Cells in normal and both stages of MMVD expressed the TUNEL marker and cleaved caspase-3, but not apoptotic bodies. The percentage of TUNEL marker and cleaved caspase-3 positive nuclei was not significantly different between groups of dogs (p > 0.05). P-Smad 2/3 and Bax were more abundant in myxomatous mitral valves while Bcl-2 was less abundant. P-Smad 2/3 primarily increased in the atrialis layer and was abundantly increased only in late-stage MMVD.
CONCLUSIONS: These data suggest that interstitial cells in MMVD are in a pro-apoptotic condition; however, they do not execute apoptosis. Thus, apoptosis does not explain differences in cellular density in canine MMVD. TGFβ1 signaling through the canonical SMAD pathway is increased in myxomatous mitral valves, but does not apparently mediate interstitial cell apoptosis in canine MMVD.
^Наверх